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醫(yī)用離心機全知道

  離心機在醫(yī)用行業(yè)適用范圍十分廣泛，主要應用于血液分離、DNA研究/免疫血液學實驗室、檢驗室、研究室等，是醫(yī)學、生物化學實驗室對血清、血漿、放射免疫理想產品, 是各類醫(yī)院血庫、實驗室、血站、醫(yī)學院校和醫(yī)學研究機構的必備設備。

  一、醫(yī)用離心機分類

1、按結構可分：臺式醫(yī)用離心機和立式醫(yī)用離心機（落地式醫(yī)用離心機）。

2、按容量可分：微量醫(yī)用離心機、小容量醫(yī)用離心機和大容量醫(yī)用離心機。

3、按規(guī)模可分：微型醫(yī)用離心機、小型醫(yī)用離心機和大型醫(yī)用離心機。

4、按溫控可分：冷凍醫(yī)用離心機（低溫醫(yī)用離心機）和常溫醫(yī)用離心機。

5、按離心方法可分：制備型醫(yī)用離心機和分析型醫(yī)用離心機。

6、按速度可分：低速醫(yī)用離心機、高速醫(yī)用離心機和超高速醫(yī)用離心機。

（1）低速醫(yī)用離心機：一般指轉速小于10000rpm的醫(yī)用離心機。

（2）高速醫(yī)用離心機：一般指轉速在10000～30000rpm的醫(yī)用離心機。

（3）超高速醫(yī)用離心機：一般指轉速大于30000rpm的醫(yī)用離心機。

7、按轉子類型：1．水平轉頭式或吊桶式。2．固定角轉頭式或角轉頭式；

  二、分離

  一是分離混懸在溶液中的顆粒。即分離血液中的有形成分，濃縮體液中細胞或其他有形成分，作分析測定用；分離與蛋白結合或抗體結合的配體及游離配體等；分離標本中已經沉淀的蛋白質。

  二是分離兩種不同密度互不相溶的液體。即在使用有機溶劑提取體液中某些成分時，最后可以用醫(yī)用離心機進行分離；分離血液中的脂質成分，如分離血漿中乳糜微顆粒及各種脂蛋白等。

  三、分離方法

  1.差速離心法。采用不同的離心速度和離心時間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法,稱為差速離心。操作時,將含有兩種不同顆粒的混懸液,以常速離心，使大的顆粒下沉，將上清液傾倒于另一離心管中，再加大離心力，離心一定時間，分離小的顆粒，反復多次分離，達到分離目的。差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。差速離心法的優(yōu)點是：操作簡單，離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開，并可使用容量較大的角式轉子；分離時間短、重復性高；樣品處理量大。缺點是：分辨率有限、分離效果差，沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級內的各種粒子不容易分開，不能一次得到純顆粒；壁效應嚴重，特別是當顆粒很大或濃度很高時，在離心管一側會出現(xiàn)沉淀；顆粒被擠壓，離心力過大、離心時間過長會使顆粒變形、聚集而失活。

差速離心示意圖

  2.速率區(qū)帶離心法。是根據分離的粒子在離心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，離心后具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內形成幾條分開的樣品區(qū)帶，達到彼此分離的目的。臨床常使用的分離液是Ficoll、Percoll及蔗糖。把靜脈血中單個核細胞分離出來，前一種分離液將血液中單個核細胞（淋巴細胞和單核細胞）分為一個層，同時提出。而Percoll分離液將血中淋巴細胞和單核細胞分為二個梯度層，分別提取。后者分離效果優(yōu)于前者，但操作繁瑣。

速率區(qū)帶離心法示意圖

  3.等密度區(qū)帶離心法。當不同顆粒存在浮力密度差時，在離心力場下，顆?；蛳蛳鲁两?，或向上浮起，一直沿梯度移動到它們密度恰好相等的位置上（即等密度點）形成區(qū)帶，稱為等密度區(qū)帶離心法。等密度區(qū)帶離心的有效分離取決于顆粒的浮力密度差，密度差越大，分離效果越好，與顆粒的大小和形狀無關，但后兩者決定著達到平衡的速率、時間和區(qū)帶的寬度。

等密度區(qū)帶離心法示意圖

  4. 分析性超速離心法。①分析型超速離心機的工作原理：分析型超速離心機主要由一個橢圓形的轉子、一套真空系統(tǒng)和一套光學系統(tǒng)所組成。該轉子通過一個柔性的軸連接成一個高速的驅動裝置，此軸可使轉子在旋轉時形成自己的軸。轉子在一個冷凍的真空腔中旋轉，其容納兩個小室：分析室和配衡室。分析室的容量一般為1ml，呈扇形排列在轉子中，其工作原理與一個普通水平轉子相同。分析室有上下兩個平面的石英窗，實驗室離心機中裝有的光學系統(tǒng)可保證在整個離心期間都能觀察小室中正在沉降的物質，可以通過對紫外光的吸收（如對蛋白質和DNA）或折射率的不同對沉降物進行監(jiān)測。在分析室中物質沉降時重粒子和輕粒子之間形成的界面就像一個折射的透鏡，結果在檢測系統(tǒng)的照相底板上產出一個“峰”，由于沉降不斷進行，界面向前推進，故“峰”也在移動，從峰移動的速度可以得到物質沉降速度的指標。

  5.密度梯度離心法。 該法又分為速率區(qū)帶離心法和等密度區(qū)帶離心法。樣品在一定惰性梯度介質中進行離心沉淀或沉降平衡，在一定離心力下把顆粒分配到梯度液中某些特定位置上，形成不同區(qū)帶的分離方法。該法的優(yōu)點是：具有很好的分辨率，分離效果好，可一次獲得較純顆粒；適用范圍廣，既能分離沉淀系數(shù)差的顆粒，又能分離有一定浮力密度的顆粒；顆粒不會積壓變形，能保持顆?；钚裕⒎乐挂研纬傻膮^(qū)帶由于對流而引起混合。缺點是：離心時間較長；需要制備梯度液；操作嚴格，不宜掌握。